محصولات و خدمات شرکت بهراد ژن:

SDS page

SDS-PAGE روشی برای جداسازی پروتئین ها بر اساس وزن مولکولی آنها می باشد. هنگامی که پروتئین ها توسط الکتروفورز از طریق ماتریس ژل جدا می شوند، پروتئین های کوچکتر به دلیل مقاومت کمتر از ماتریس ژل سریعتر عبور می کنند. همچنین ساختار و بار پروتئین بر سرعت حرکت پروتئین در ماتریس ژل تأثیر می گذارد. در SDS-PAGE، استفاده از سدیم دودسیل سولفات و ژل پلی آکریل آمید تا حد زیادی تأثیر ساختار و بار را از بین می برد و پروتئین ها تنها بر اساس طول زنجیره پلی پپتیدی جدا می شوند. در حضور یک عامل کاهنده که پیوندهای دی سولفیدی را می شکند، پروتئین ها به زنجیره های خطی متناسب با طول زنجیره پلی پپتیدی باز می شوند که به این حالت شرایط احیاشده (Reduced) گفته می شود.

تست اندوتوکسین (BET)

فرآورده های دارویی تزریقی می بایستی از نظر ایمنی مطابق با دستورالعمل های بین المللی تولید و نگه داری شوند. یکی از مهمترین پارامترهای ایمنی، تب زایی یا پایروژن بودن محصول می باشد. پایروژن یا تب زا، موادی هستند که تب را تحریک می کنند و اگر بیش از غلظت های خاص برای انسان تجویز شوند، می توانند مضر یا حتی کشنده باشند. به طور خاص، آزمایش LAL برای تشخیص و در برخی موارد کمی کردن حضور اندوتوکسین ها، که به عنوان لیپوپلی ساکارید (LPS) نیز شناخته می شود، مورد استفاده قرار می گیرند. در این تست از خون خرچنگ نعل اسبی به عنوان پیش ماده واکنش ده با LPS استفاده می شود که در صورتی که میزان اندوتوکسین بیش از غلظت اعلام شده باشد، سبب تشکیل کلات خواهد داد.

تعیین نقشه قندی (Glycan mapping)

عمده پروتئین های دارویی شامل مونوکلونال آنتی بادی ها، هورمون ها و ...... گلیکوپروتئین می باشد.گلیکوزیلاسیون یکی از مهمترین تغییرات پس از ترجمه می باشد، زیرا افزوده شدن گلیکان به پروتئین در اثربخشی و کارکرد آن پروتئین نقش اساسی دارد. الگوهای گلیکوزیلاسیون در سلول های انسانی عموماً از یک الگوی آنتن مانند بر اساس ساختار هسته مشترک پیروی می¬کنند. بدلیل دشوار بودن تهیه یک رده سلولی که الگوی گلیکوزیلاسیون کاملا مشابهی با الگوی گلیکوزیلاسیون سلول های انسان داشته باشد، دستورالعمل هایی جهت تعیین نقشه گلیکان ارائه شده است. این دستورالعمل شامل استفاده از یک آنزیم خاص به نام PNGase F، برای جدا کردن گلیکان های متصل به N، برچسب زدن آنها با فلوروفور برای افزایش حساسیت تشخیص و سپس جداسازی آنها با استفاده از ستون های کروماتوگرافی برهمکنش آبدوست (HILIC) و درنهایت آشکارسازی آنها با دتکتور فلورسانس می باشد.

تعیین نقشه پپتیدی (Peptide mapping)

نقشه یابی پپتیدی به طور گسترده ای در توسعه پروتئین های درمانی، مانند آنتی بادی های مونوکلونال و ترکیبات آنتی بادی-دارو (ADCs) استفاده می شود. این روش یکی از اصلی ترین آزمون های شناسایی (Identification) محصول پروتئینی می باشد که مبتنی بر شناسایی ساختاری اولیه پروتئین (توالی اسید آمینه) است. در این روش ابتدا پروتئین بوسیله یک آنزیم خاص (عموما تریپسین) به قطعات کوچکتر تبدیل می شود، سپس الگوی قطعات برش یافته به کمک RP-HPLC مورد ارزیابی قرار می گیرد. جهت تایید تشابه ساختار نوع اول پروتئین، عملیات مشابه روی نمونه پروتئین استاندارد انجام شده و الگوی پروتئین مدنظر با الگوی پروتئین استاندارد مقایسه خواهد شد.

SE-HPLC

خلوص ماده دارویی یکی از اصلی ترین پارامترهای کیفیت دارو می باشد که میتوان با روش های مختلفی اندازه گیری شود. یکی از دقیق ترین روش ها SE-HPLC می باشد. SE-HPLC یک روش کروماتوگرافی است که در آن مولکول های موجود در محلول بر اساس سایز مولکول جدا می شوند. این متد بطور گسترده برای جداسازی مولکول های بزرگ یا کمپلکس های ماکرومولکولی مانند پروتئین ها و پلیمرهای صنعتی استفاده شده است. از SE-HPLC برای تعیین میزان پروتئین های تجمع یافته (Aggregated) و همچنین تعیین غلظت پروتئین مورد استفاده قرار می گیرد.

RP-HPLC

یکی از آزمون های رایج در کنترل کیفیت محصولات دارویی، مطالعه ساختار با RP-HPLC می باشد که عمدتا فرم های اکسید، آمید شده و فولدینگ پروتئین را بررسی می کند. در سیستم RP-HPL، ستون از گروه¬های غیر قطبی با استفاده از پیوندهای کوالان به آنها متصل¬اند تشکیل شده است در واقع در این روش فاز متحرک از حلال¬های قطبی و فاز ساکن از ترکیبات غیر قطبی است. مکانیسم جداسازی در کروماتوگرافی فاز معکوس به برهمکنش های آب¬گریز برگشت¬پذیر، که بین ترکیبات موجود در نمونه و زنجیره¬های هیدروکربنی که در فاز ساکن وجود دارند، وابسته است.

تعیین پتنسی دارو ها بر اساس روش های In vivo

آزمون پتنسی یا فعالیت محصول دارو مهترین آزمون کنترل کیفی برای داررو ها است که مستقیما میزان اثر بخشی آنها را بررسی می کند. روش های مختلفی برای ارزیابی اثر بخشی داروها وجود دارد در شرکت بهراد ژن فارمد امکان توسعه و ستاپ روش های In-vitro و In-vivo برای هر محصول وجود دارد.